在長(zhǎng)江流域棉區(qū)，紅鈴蟲(chóng)是一種非常重要的寡食性害蟲(chóng)，在自然條件下一般只危害棉花的蕾、花和鈴，給當(dāng)?shù)氐拿藁ㄉa(chǎn)造成了嚴(yán)重的損失。調(diào)查表明，在轉(zhuǎn)Bt基因棉花種植以前，由紅鈴蟲(chóng)危害造成的經(jīng)濟(jì)損失一般為10%～30%左右．而在轉(zhuǎn)Bt基因棉大面積推廣種植以后，紅鈴蟲(chóng)對(duì)棉花的危害顯著下降，但由此而引起的紅鈴蟲(chóng)對(duì)轉(zhuǎn)Bt基因棉抗性的發(fā)展受到了廣泛關(guān)注。因此，有必要就紅鈴蟲(chóng)對(duì)crylAc蛋白的抗性遺傳規(guī)律進(jìn)行研究，在進(jìn)行該項(xiàng)研究之前首先要掌握紅鈴蟲(chóng)的室內(nèi)人工飼養(yǎng)技術(shù)。關(guān)于紅鈴蟲(chóng)人工飼料的配方及室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù)國(guó)外已有大量報(bào)道，并且相關(guān)技術(shù)非常成熟。在國(guó)內(nèi)，陸伊文于1980年首次報(bào)道了應(yīng)用棉子粉加蛋白質(zhì)飼料作為紅鈴蟲(chóng)的人工飼料，成功飼養(yǎng)了600多頭幼蟲(chóng)，由于飼料中含有紅鈴蟲(chóng)的天然寄主成分，取材相對(duì)困難，故無(wú)法將該技術(shù)進(jìn)行大規(guī)模的應(yīng)用。束春娥和李文谷等將該技術(shù)進(jìn)行了改進(jìn)，用麥胚飼料飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)，連續(xù)飼養(yǎng)了上萬(wàn)頭幼蟲(chóng)，但該技術(shù)尚未被運(yùn)用。至此，在國(guó)內(nèi)仍無(wú)法實(shí)現(xiàn)室內(nèi)長(zhǎng)期飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)。從2003年起，我們開(kāi)始了紅鈴蟲(chóng)人工飼料配方及飼養(yǎng)技術(shù)的研究，目前用人工飼料已連續(xù)飼養(yǎng)了30代以上。
1、材料與方法
1.1供試蟲(chóng)源
2003年將采自湖北省潛江縣棉田的紅鈴蟲(chóng)老熟幼蟲(chóng)帶回室內(nèi)，置于29±loC．L:D=14:10 h，相對(duì)濕度為60%的條件下打破滯育。待紅鈴蟲(chóng)老熟幼蟲(chóng)化蛹后，將蛹揀于一端用細(xì)紗密封、直徑為15 cm的圓柱形產(chǎn)卵罐中，同時(shí)向產(chǎn)卵罐投入5%的蜂蜜水以供羽化后的成蟲(chóng)取食。一旦成蟲(chóng)開(kāi)始羽化，即將濾紙置于產(chǎn)卵罐的細(xì)紗上，用重物壓住以用于卵的收集。待產(chǎn)卵開(kāi)始后，每天揭下有卵的濾紙，放入干凈的罐頭瓶?jī)?nèi)孵化，同時(shí)在產(chǎn)卵罐蓋上新的濾紙。
1.2飼料組成
本試驗(yàn)所用的麥胚飼料主要依據(jù)Adkisson等的配方改進(jìn)而來(lái)。飼料組成：麥胚（南京面粉廠），大麥和黃豆（湖北省農(nóng)科院糧食作物研究所），百花蜂蜜（湖北大華蜂業(yè)有限公司），福臨門(mén)玉米油（東海糧油工業(yè)張家港有限公司），啤酒酵母（湖北安琪酵母股份有限公司），瓊脂（福建省莆田市秀嶼區(qū)平海瓊脂廠），干酪素（北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司），a-纖維素和尼泊金（西隴化工有限公司），蔗糖、山梨酸鉀、苯甲酸和苯甲酸鈉（北京化學(xué)試劑公司），泛酸鈣（天津市博迪化工有限公司），煙酸（上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司），核黃素（天津市化學(xué)試劑公司分公司），鹽酸吡鄉(xiāng)辛（天津市化學(xué)試劑公司分公司），硫胺素鹽酸鹽（上海崇明裕西廠），氯化膽堿（上海三愛(ài)思試劑有限公司），抗壞血酸（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司），生物素（浙江康普達(dá)生物科技有限公司）和維生素B12（浙江康普達(dá)生物科技有限公司）。
1.3飼料配方
試驗(yàn)設(shè)4個(gè)配方：A．麥胚+干酪素+山梨酸鉀+尼泊金；B，大麥+干酪素+山梨酸鉀+尼泊金；C，麥胚+黃豆粉+山梨酸鉀+尼泊金；D，麥胚+防腐劑+苯甲酸+苯甲酸鈉（表2）。配置方法：先用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)量各種固體配料，然后將瓊脂溶解在足夠的水中加熱至沸騰，其余固體成分在燒杯中充分混勻并加入玉米油、蜂蜜再次混勻，最后將溶化好的瓊脂加入混合物中攪拌均勻。
1.4接蟲(chóng)
將配好的飼料切成蘿卜條狀（約4 g），裝入長(zhǎng)75 mm、內(nèi)徑20 mm的養(yǎng)蟲(chóng)管內(nèi)，用精致毛刷接入紅鈴蟲(chóng)初孵幼蟲(chóng)，每管接1頭，用干凈、滅菌棉塞塞緊，以防幼蟲(chóng)逃走。然后放置在29±l℃、L:D=14:10h．相對(duì)濕度60%的條件下飼養(yǎng)。飼養(yǎng)過(guò)程中如發(fā)現(xiàn)個(gè)別管內(nèi)飼料干枯，可用鑷子補(bǔ)充一小塊新鮮飼料，幼蟲(chóng)即可繼續(xù)取食成長(zhǎng)[2]。每個(gè)配方接蟲(chóng)50頭，重復(fù)3次。每個(gè)試管標(biāo)號(hào)，每天觀察記錄以確定幼蟲(chóng)每一個(gè)生長(zhǎng)階段的歷期。
2、結(jié)果與分析
2.1 4種飼料配方飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)的結(jié)果
從表3可以看出，以B配方的紅鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)成活率最高，達(dá)68.10%；D配方成活率最低，只有24.70%。A、B兩配方的幼蟲(chóng)存活率無(wú)顯著差異，但極顯著地高于C、D兩配方。對(duì)不同處理的平均幼蟲(chóng)期分析表明，取食A配方的幼蟲(chóng)期最短，為18.57 d、取食B配方的最長(zhǎng)，為49.29 d。不同處理之間幼蟲(chóng)的平均歷期具有極顯著差異(P．(0.01)。在蛹重和蛹期方面，以A配方的蛹重最高，為0.02 g，顯著高于其他處理(P<0.05)；D配方的蛹期最短，為10.09 d，與A配方無(wú)顯著差異，但低于其他處理。成蟲(chóng)性比差異很小，均接近1:1。羽化率穩(wěn)定在80%以上。
2.2 A配方飼料連續(xù)飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)的結(jié)果
麥胚飼料連續(xù)飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)的結(jié)果列于表4。從表中可知，1～4代連續(xù)飼養(yǎng)的幼蟲(chóng)成活率逐漸提高，至第4代時(shí)已超過(guò)75%。從幼蟲(chóng)期、蛹期和產(chǎn)卵量看，第3代與第4代幼蟲(chóng)期差異不顯著（P>0.05）。不同代別間蛹期和成蟲(chóng)產(chǎn)卵量無(wú)顯著差異(P>0.05)。從性比和羽化率看，差異都不大，性比維持在1:1左右，羽化率最高為95.27%，最低為87.55%（表4）。
2.3不同飼料飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)的結(jié)果比較
從表5可知，F(xiàn)4代飼養(yǎng)與田間采集、Adkisson飼養(yǎng)比較，除單雌產(chǎn)卵量(70.6粒)較高外，其余3項(xiàng)均相差不大。另外，Adkisson飼養(yǎng)的成活率可達(dá)到81%，我們目前最高存活率也已達(dá)到了75%以上。
富通新能源生產(chǎn)銷(xiāo)售的
顆粒機(jī)、
秸稈顆粒機(jī)是養(yǎng)殖戶(hù)們生產(chǎn)顆粒飼料很好的選擇。
3、討論
目前用麥胚飼料飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)雖然效果較好，但是大批量飼養(yǎng)時(shí)昂貴的麥胚酪元飼料將成為限制因素。如果以大麥及黃豆粉分別代替麥胚和酪元飼養(yǎng)紅鈴蟲(chóng)，效果并不理想。而以黃豆粉替代純酪元是目前國(guó)外飼料配方之一。在Miller1996年報(bào)道中，其配方以黃豆粉為主要成分，幼蟲(chóng)生長(zhǎng)情況良好。因此我們有必要進(jìn)一步摸索。
在防腐劑的選擇方面，避免使用福爾馬林，以克服飼料中福爾馬林的刺激氣味。我們選擇了尼泊金、山梨酸鉀和苯甲酸、苯甲酸鈉兩組進(jìn)行比較，結(jié)果D配方的存活率低，主要是由于飼料發(fā)霉所致，可見(jiàn)防腐劑的種類(lèi)對(duì)防腐效果有一定影響。從目前的情況來(lái)看，以A配方飼養(yǎng)的紅鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)在連續(xù)飼養(yǎng)4代后，幼蟲(chóng)成活率基本穩(wěn)定在70%以上，而且幼蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育整齊，化蛹集中，成蟲(chóng)發(fā)育正常，基本可以滿(mǎn)足室內(nèi)試驗(yàn)的需要。
